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    StarBright染料--星光高亮抗體 助力多色方案

    2022-11-18
    瀏覽次數: 66

    星光染料是一種獨特的熒光納米粒子,將它與 Bio-Rad 高度驗證的抗體結合,專為流式細胞術開發,為您提供卓越染色效果。星光染料使稀有群體和低密度抗原易于分辨,同時保持適用于任何多色實驗的靈活性。

    本篇將幫助你了解高亮星光染料如何助力流式細胞術實驗。


    優勢:

    不僅,且發射波譜

    ,無需特殊染色溶液

    ,批間重現性好

    ,溶液兼容性好

    ,與所有儀器和抗體可共用


    第一批上市染料

    StarBright Blue

    StarBright染料--星光高亮抗體 助力多色方案

    StarBright Violet

    StarBright染料--星光高亮抗體 助力多色方案

    明亮,溢漏減少

    星光染料具有優化的激發和發射特性,并具有優越的亮度。它可以更好地分辨特定細胞群,包括稀有和低密度抗原,同時最大限度地減少熒光溢漏,更大程度地避免染料在多色方案中擴散現象。用星光染料,你可以輕松地建立更大的實驗方案。

    StarBright染料--星光高亮抗體 助力多色方案

    圖1. 和同類染料相比,星光染料改進了亮度和熒光溢漏。A, 和其它兩個染料相比,SBB700(粉紅色)在640nm只是非常有限的被激發。B, 人外周血在含1%BSA的PBS溶液中用CD4 AMO (Cat.#MCA1267AMO)、CD4 Brilliant Violet 510和CD4 StarBright Violet 515(#MCA1267SBV515)分別染色,所有數據在ZE5流式細胞分析儀上采集。直方圖顯示了這些抗體的亮度,圖片右側顯示了這三種染料的染色指數。


    很容易融入到你現有的實驗

    它們與大多數染色方案兼容,幾乎可以在任何緩沖液中工作,包括商用聚合物染色緩沖液,它們的性能不會有損失(圖 2)。它們可以與其他星光染料、有機熒光染料、基于蛋白質的熒光染料和其他聚合物染料結合,而不需要特殊染色方案(圖 2C),使您可以輕松構建更大的多色實驗方案。

    StarBright染料--星光高亮抗體 助力多色方案StarBright染料--星光高亮抗體 助力多色方案
    StarBright染料--星光高亮抗體 助力多色方案

    圖2. 緩沖溶液的兼容性。人外周血分別在含有BSA、EDTA和NaN3的緩沖液中,A, 用CD4 Pacific Blue和CD4 SBV440染色,B, 用CD4 BV510和CD4 SBV515染色,星光染料的性能均沒有下降。C, 人外周血在含1%BSA的PBS溶液中用CD3 A488 (#MCA463A488), CD19 SBB700 (#MCA1940SBB700), CD4 SBV515 (#MCA1267SBV515), CD8 SBV440 (#MCA1226SBV440), CD127 A647 (#HCA145A647), and CD25 PE (#MCA2127PE)染色,所有數據在ZE5流式細胞分析儀上采集。與其他基于聚合物的染料不同,組合多種星光染料不需要特殊的染色緩沖液。


    與所有流式細胞儀兼容

    StarBright 染料在 ZE5 流式細胞分析儀上開發出來,可以用于任何帶有合適激光器和濾光片的流式細胞儀,包括流式細胞分選儀。此外,它們也已經被用在光譜流式細胞儀上。

    StarBright染料--星光高亮抗體 助力多色方案

    StarBright染料--星光高亮抗體 助力多色方案

    StarBright染料--星光高亮抗體 助力多色方案

    圖 3. 儀器兼容性。人外周血在含 1%BSA 的 PBS 中,用 CD8 SBV610(#MCA1226SBV610)、CD4 SBV515(#MCA1267SBV515)、CD127 A647(#HCA145A647)和 CD25 SBV440(#MCA2127SBV440)4℃染色 30 分鐘。使用 A, 常規流式細胞儀和 B, 光譜流式細胞儀獲得了

    類似的 Treg( CD4+、CD25+、CD127lo)結果。C, 光譜流式上,人外周血用 CD4BV605 和 CD8SBV610(MCA1226SBV610)染色,易于識別。


    批間重現性好

    與某些聚合物和其他染料不同,星光染料可以具有很高的批間重現性(圖 4),穩定,耐光漂白,不會隨著時間的推移而損失性能。它們還表現出較少的交叉激光激發,不會像串聯染料一樣只受主體染料激發。此外,它們可以固定在多聚甲醛中,熒光幾乎沒有下降。


    表1.批間重現性

    批次染色指數靶細胞群
    SBV515-1

    213.5

    210.0

    203.4

    72.9%

    70.7%

    70.7%

    SBV515-2

    253.2

    245.1

    258.5

    72.8%

    72.7%

    72.1%

    SBV515-3

    222.4

    204.8

    193.6

    71.9%

    70.5%

    69.8%

    平均值222.771.6%
    偏差23.710.01
    StarBright染料--星光高亮抗體 助力多色方案

    圖4. 星光染料的批間重現性。用三批CD4?

    SBV515(MCA1267SBV515)對人外周血進行

    染色,以評估染色指數的差異和各批CD4陽性

    率。表中所示的重疊(實線)、實際染色指數

    和陽性百分比數據的變化都是最小。


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